17a-OH Progesterona
Procedimento de extração para amostra Neo Natal
Nota: A recuperação reportada para este método é de aproximadamente 85 - 90%.
Materiais Necessários:
·Padrão Zero fornecido juntamente com o kit.
·N-propanolol, grau HPLC.
·H-heptano, grau HPLC.
·Tubos cônicos para centrífuga de 5 mL, limpo em solução ácida.
·Gás nitrogênio
Procedimento:
1.Prepare propanolol a 3% em solução de heptano (ex. 3 mL de propanolol para 100 mL de heptano).
2.Adicione ao tubo cônico: 300µL de amostra de soro + 3.0 mL de propanolol/heptano. Nota: A diluição pode ser ajustada se houver suspeita de que o valor da amostra está muito alto.
3.Tampe o tubo e inverta gentilmente e continuamente por 2 minutos.
4.Centrifugue a velocidade de aproximadamente 2000 rpm por 10 minutos.
5.Transfira 1.5 mL da fase orgânica para um tubo de vidro de 12x75 mm.
6.Evapore a fase orgânica sob um leve fluxo de gás nitrogênio.
7.Reconstituir o resíduo com 150µL do padrão zero (fornecido com o kit).
8.Proceda com o ensaio normalmente. A duplicata pode ser feita com o resíduo reconstituído. Não é necessário proceder à extração em duplicata.
- Fonte: Lee A, Ellis G: Serum 17a-OH progesterone in infants and children as measured by a direct radioimmunoassay kit. Clinical Biochemistry 24:505-511, 1991.
Por: Sônia M.M.Fleira
Assessoria Científica
