Gluten-Tec® ELISA
O glúten é um nome comum para gliadina e glutelinas, proteínas insolúveis em água encontrada nos cereais. Aproximadamente 1% da população do mundo ocidental não pode tolerar cereais e sofre de doença celíaca (CD).
Por mais de uma década o professor Frits Koning e seu grupo no "Leiden University Medical Center", estudaram os genes e peptídeos envolvidos na intolerância ao glúten e à ocorrência de Doença Celíaca. A percepção da interação entre o HLA-DQ, glúten e células T resultou na identificação de epitopos de células T estimuladoras de epítopos nas proteínas gliadina. Peptídeos sintéticos contendo estes epitopos foram usados para produzir anticorpos monoclonais e em cooperação com EuroProxima um teste comercial foi desenvolvido.
O kit Gluten-Tec® ELISA é um imunoensaio enzimático competitivo para a detecção quantitativa de gliadina e fragmentos em alimentos. O kit utiliza um anticorpo monoclonal de camundongo, que detecta o epítopo de α20-gliadina (epítopo estimulatório de células T) em trigo e as sequências homólogas em cevada (hordeína), centeio (secalina) e suas variedades híbridas. Estes epítopos desempenham um papel dominate no desencadeamento da doença celíaca. Os dois pequenos e intactos fragmentos de proteína, resultantes da hidrólise de proteínas intactas, podem ser detectados. Um peptídeo sintético que contém o epítopo de α20-gliadina é utilizado para calibração, o que permite uma padronização exata e reprodutível.
Este padrão peptídeo é um conceito completamente novo em testes gliadina. Em contraste com os padrões obtidos a partir de variedades de trigo este peptídeo sintético é 100% reprodutível, o que é o principal critério para um padrão verdadeiro.
Outra vantagem principal deste ELISA competitivo é o fato de que é capaz de dosar a gliatina total e gliadina fragmentada em um único ensaio, evitando o risco de resultados falso-negativos em materiais processados.
A sensibilidade e a especificidade do glúten-Tec ® ELISA foi determinada e confirmada através dos resultados obtidos a partir de uma colaboração RING-trial em 10 laboratórios independentes na Europa e nos EUA.
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Literatura
Spaenij-Dekking EHA et al. A novel and sensitive method for the detection of T cell stimulatory epitopes of α/β- and γ- gliadin. GUT, 53: 1267-1273 (2004)
Mitea C, et al. Fine specificity of monoclonal antibodies against celiac disease-inducing peptides in the gluteome. Am. J. Clin. Nutrition 88, 1057-1066, 2008
Dariusz Stepniak, Frits Koning. Celiac Disease-Sandwiched between Innate and Adaptive Immunity. Human Immunology 67,460-468, 2006

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